流式細胞分析暨分選核心

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  第二台
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流式細胞分選服務預計自3/1起開放線上預約,如有任何疑問請洽技術師(分機65726)。

2017/11/18 由於人事異動,流式細胞核心實驗室自11/25起將暫時停止服務,若有急用請與三共莊雅婷博士聯繫(分機65720),感謝您的配合。

2015/11/9 流式細胞儀Sorter搬家嘍~ 為使Flow Core能就近提供更完整的服務,原本位於2共的流式細胞分選儀,現已遷至3共的免疫移植室。
讓分選儀(sorter)、分析儀(LSRII) 及 DATA分析軟體Flow jo還有技術員,通通在一起~

有問題,來諮詢就對了~
Sorter Room分機現為65726,歡迎舊雨新知踴躍預約使用 !

2015/11/9 醫學研究部流式細胞核心設施新增第二台FACSArial III 分選儀,配置有488, 561, 633, 405 nm四支雷射,目前已測試完成,
將於2015/11/10起,開放下午時段預約使用,歡迎舊雨新知踴躍預約使用 !

2015/9/15
為提供大家更完善的服務,醫學研究部流式細胞核心設施之高階流式細胞分析儀 (LSRII),新增633nm紅光雷射,目前已完成測試並開放使用。原有使用者須注意前來預約使用
時,須聯絡『核心管理員』開立新帳號。

醫學研究部流式細胞核心設施新增第二台FACSArial III 分選儀, 請密切注意線上預約即將開放。

為配合空間重整,LSRII室需進行部份施工,預計10/2(五)下午1:00至10/6(二)中午12:00止,暫停使用與服務,不便之處敬請見諒。

2015/6/15
網路預約系統流式細胞分析儀 (LSRII)自行操作部份已升級上線嘍~
可在網路預約系統上即時預約、全天候二十四小時開放。不分院內外,預約e指通,歡迎多加使用。
第一次使用者申請完帳號後請記得聯絡儀器管理人做自行操作的使用授權。

2014/10/21
好康大放送,細胞分選服務推出優惠活動,期間使用三個時段贈送一個時段,還有機會獲得神秘小禮物。
現正熱切開放現正熱切開放服務中,歡迎大家多加利用。

流式細胞分析暨分選核心

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本核心設立的宗旨在幫助台大醫學校區的研究者進行流式細胞相關實驗,提供細胞分選、流式細胞分析、流式細胞實驗數據分析、流式細胞實驗設計及諮詢等多項服務,
目前設置有兩台流式細胞分選儀(BD FACSAriaIII)和一台高階多色流式細胞分析儀(BD LSRII),並聘有專職技術師來進行操作與維護的工作。

服務項目

流式細胞分選儀 由專人操作,不開放個人操作

  • 常規細胞分選

    Human and murine primary cells
    Cell suspension from bone marrow
    Tissue culture cell lines
    Single-cell suspension from tumors

  • 特殊細胞分選

    若有上述以外細胞分選之需求,請事先e-mail或來電與管理人員聯絡。

流式細胞分析儀

  • 委托操作服務:請至「委託操作頁面」選取欲上機的時段(接受委託時段為星期一至星期四,8:00-12:00及13:00-17:00)
    操作員會於每天上班日早上九點前根據「預約者提交的時間」依序確認委託,故請定期至「我的預約紀錄」查詢最新的預約狀況。
    若第一次委託,請先與技術人員討論實驗內容。
    (469KB)

  • LSRII儀器操作訓練:請先與技術人員聯絡安排儀器訓練時間

管理人員與連絡方式

  • 流式細胞分選儀:黃裕文 - 技術師 # 2312-3456 ext 65725 / 65726
  • 流式細胞分析儀:蔡靜儀 - 專案研究助理 # 2312-3456 ext 65725 / 65726
  • 莊雅婷 - 專案助理研究員 # 2312-3456 ext 65720

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流式細胞分選儀FACSAriaIII、IV 收費標準:

雷射啟動支數 收費金額
兩支雷射(其中一支必含488nm) 新台幣750元/2小時
三支雷射(其中一支必含488nm) 新台幣1,000元/2小時
四支雷射 新台幣1,250元/2小時

1.流式細胞分選儀的收費方式依據雷射啟動的支數來進行計價,並以2小時為一個單位計算。

2.使用時間未達預約時間長度時,以預約時間長度為基準進行收費。

3.超過預約時間仍未前來使用者,按照原預約時間長度收費。

4.若需要,在不影響下一位使用者的使用權益下,經管理人員同意得延長使用時間,但需補繳超時使用費用。未滿一個單位者以一個單位計算。

5.若需要,在不影響其他使用者的使用權益下,得提前進行實驗,但以預約時間長度為基準進行收費,超過預約時間長度者需加收超時使用的費用。未滿一個單位者以一個單位計算。

6.非因儀器故障導致實驗結果不良,使用者仍須依收費標準付費。
** 請小心評估完成實驗所需要的時間以決定預約時間的長度!!

流式細胞分析儀LSRII 收費標準:

儀器設備 自行操作 操作員操作 校外人士使用
LSRII 新台幣100元/小時 新台幣250元/小時 新台幣650元/小時

1. 流式細胞分析儀收費以小時為單位,未滿一小時者以一小時計算。

2. 使用時間未達預約時間長度時,以預約時間長度為基準進行收費。

3. 超過預約時間仍未前來使用者,按照原預約時間長度收費。

4. 若需要,在不影響下一位使用者的使用權益下,經管理人員同意得延長使用時間,但需補繳超時使用費用。未滿一小時者以一小時計算。

5. 若需要,在不影響其他使用者的使用權益下,得提前進行實驗,但以預約時間長度為基準進行收費,超過預約時間長度者需加收超時使用的費用。未滿一小時者以一小時計算。

6. 非因儀器故障導致實驗結果不良,使用者仍須依收費標準付費。

委託服務收費流程:

  • 上機時請列印sorter服務申請單,並請計畫主持人簽名後交給技術員。(若委託操作分析儀則不需繳交)
  • 技術員會以計畫主持人為對象,統計使用狀況並向醫院核銷或申請收據核銷。或可選擇以現金支付(請持使用申請單及現金至醫院出納組直接繳費)。
  • 經查核無繳費之實驗室皆一律禁止使用共研之任何儀器。
流式細胞分析暨分選核心

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本核心實驗室目前設有兩台流式細胞分選儀(BD FACSAriaIII)和一台高階多色流式細胞分析儀(BD LSRII),儀器配備簡介如下:

流式細胞分選儀:

4 laser FACSAriaIII-1

FACSAriaIII(原3 laser)的分選儀加裝雷射後,現備有四支雷射 (488nm Blue Laser、561nm Yel Green Laser、633nm Red Laser 及 405nm Violet Laser),設有16個螢光檢測器,可同時激發出15色螢光。

其激發光雷射/集光濾鏡規格組態如下:

laser Detector LP mirror BD filter fluorochrome
Blue Laser - 488nm Trigon A 655 LP 695/40 PI, PE-Cy5, PerCP-Cy5.5, PerCP, 7ADD
B 502 LP 530/30 FITC, GFP, DCFHDA
C N/A 488/10 SSC
Yel Green Laser - 561nm Octagon A 735 LP 780/60 PE-Cy7
B 630 LP 670/14 PE-Cy5
C 600 LP 610/20 PE-TxRed, mcherry, ddtomato, A594
D N/A 582/15 PE, DsRed, A546
Red Laser - 633nm Trigon A 735 LP 780/60 APC-Cy7, Alexa Fluor 750
B 690 LP 730/45 Alexa Fluor 700
A680, APC-Cy5.5
C N/A 670/30 APC, Cy5, Alexa Fluor 647
Violet Laser - 405nm Octagon A 750 LP 780/60 BV786
B 690 LP 710/50 BV711
C 635 LP 660/20 BV650, Qdot525
D 595 LP 610/20 BV605
E 502 LP 510/50 BV510, AmCyan, CFP,
A430, Qdot525, V500
F N/A 450/40 BV421, Pacific Blue,
Alexa405(A405), V450

4 laser FACSAriaIII-2

FACSAriaIII的分選儀同樣配備有四支雷射 (488nm Blue Laser、561nm Yel Green Laser、633nm Red Laser 及 405nm Violet Laser),設有16個螢光檢測器,可同時激發出15色螢光。

其激發光雷射/集光濾鏡規格組態如下:

laser Detector LP mirror BD filter fluorochrome
Blue Laser - 488nm Trigon A 655 LP 695/40 PI, PE-Cy5, PerCP-Cy5.5, PerCP, 7ADD
B 502 LP 530/30 FITC, GFP, DCFHDA
C N/A 488/10 SSC
Yel Green Laser - 561nm Octagon A 735 LP 780/60 PE-Cy7
B 630 LP 670/14 PE-Cy5
C 600 LP 610/20 PE-TxRed, mcherry, ddtomato, A594
D N/A 582/15 PE, DsRed, A546
Red Laser - 633nm Trigon A 755 LP 780/60 APC-Cy7, Alexa Fluor 750
B 690 LP 730/45 Alexa Fluor 700
A680, APC-Cy5.5
C N/A 670/30 APC, Cy5, Alexa Fluor 647
Violet Laser - 405nm Octagon A 750 LP 780/60 BV786
B 690 LP 710/50 BV711
C 635 LP 660/20 BV650, Qdot525
D 595 LP 610/20 BV605
E 502 LP 510/50 BV510, AmCyan, CFP,
A430, Qdot525, V500
F N/A 450/40 BV421, Pacific Blue,
Alexa405(A405), V450

高階多色流式細胞分析儀:LSRⅡ

此分析儀目前配備有四支雷射 (488nm Blue Laser,633nm Red Laser, 405nm Violet Laser及355nm UV Laser),設有15個螢光檢測器,可同時激發出14色螢光。
除了應用在測定淋巴球表面抗原、白血病分類、細胞週期和細胞凋亡等實驗分析外,還可提供使用者針對幹細胞做side population的偵測。

其激發光雷射集光濾鏡規格組態如下:

laser Detector LP mirror BD filter fluorochrome
Octagon (488-nm blue laser) A 735 LP 780/60 PE-Cy7
B 685 LP 695/40 PI, PE-Cy5, PerCP-Cy5.5, PerCP, 7ADD, Acridine Orange, AU
C 550 LP 575/26 PE, PI, TMRE
D 505 LP 530/30 FITC, GFP, DCFHDA
E Blank 488/10 SSC
Trigon (633-nm red laser) A 755 LP 780/60 APC-Cy7, Alexa Fluor 750
B 690 LP 730/45 Alexa Fluor 700
A680, APC-Cy5.5
C Blank 670/30 APC,Cy5, Alexa Fluor 647
Violet Octagon (405-nm violet laser) A 750LP 780/60 BV786
B 690LP 710/50 BV711
C 595LP 610/20 BV605
D 505LP 525/50 BV510, AmCyan, CFP,
A430, Qdot525, V500
E Blank 450/40 BV421, Pacific Blue,
Alexa405(A405), V450
UV Trigon (355-nm UV Laser) A 635 LP 670/14 Side Pop, Hoechst Red
B Blank 450/50 Hoechst33258, Hoechst Blue, DAPI, Alexa350,
流式細胞分析暨分選核心

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一、細胞分儀檢體製備與預約說明:

細胞分析儀檢體製備:

  • 樣品必須先過濾去除黏聚的細胞團塊或組織塊,譬如以Cell Strainer (BD#352340,with 40 μm nylon mesh) 進行過濾,或使用具有過濾上蓋之無菌管(BD#352235)。
    若用未過濾的樣品上機而造成機器堵塞及損壞,使用者需負賠償責任。
  • 上樣細胞濃度要求為5-10x10^5/ml。若細胞數過少,至少需置於400-500ul體積中。
  • 軟體內只保留「三週內的data」,請使用者自備光碟儲存data。

細胞分析預約:

  • 開放一個月內的預約時段。若需委託上機,最晚需於委託服務前七天預約。
  • 預約取消:「委託預約者」可於技術師確認委託之前取消選取的時間,但操作員確認後就無法自行取消委託預約,
    故若需取消預約請至少於預約日前一天來電取消;「自行操作者」最遲須於預約時段前四小時自行取消,否則即按原價收取費用。
  • 收費方式以1 hr為計算單位,請謹慎預估時間,避免遲到。
  • 如有任何疑問請與專人聯絡 :蔡靜儀 專案研究助理,分機:65726/65725 。

二、細胞分儀檢體製備與預約說明:

細胞分選儀檢體製備:

  • 樣品必須先過濾去除黏聚的細胞團塊或組織塊,譬如以Cell Strainer (BD#352340,with 40 μm nylon mesh) 進行過濾,或使用具有過濾上蓋之無菌管(BD#352235)。
    若用未過濾的樣品上機而造成機器堵塞及損壞,使用者需負賠償責任。
  • 若欲分選轉染GFP,YFP或DsRed 之樣品,需提供未經轉染的相同細胞做為控制組樣品,作為儀器校正用。
    若欲以多重螢光染色進行分選,需提供各種單一螢光染色之樣品作為調整校正之用。
  • 控制組樣品細胞(包含未經轉染及單染)濃度要求為2-10x10^5/ml,若細胞數過少,至少需置於200ul體積中。
  • 預約時間及樣品製備數量估算:上樣流速為5*10^3-1*10^4/sec為基準,以每10 ul/min 進行估算。

細胞分選預約:

  • 一般分選預約:開放一個月內的預約時段。
  • 緊急案件預約:以人類檢體為限,並請務必提前一天17:00前先與技術師確認可否上機。聯絡分機:65726。
    計價均為一般案件之二倍計算。
  • 預約取消:若需取消預約請至少於預約日前一天(17:00前)來電取消,否則即按原價收取費用。
  • 軟體內只保留「半年內的data」,請使用者自備光碟儲存data。
  • 如有任何疑問請與專人聯絡: 黃裕文 技術師,分機:65726/65725 。

三、本部提供之流式細胞儀實驗結果若載入發表文獻中,請於致謝 (Acknowledgement) 處提及本部:

we would like to acknowledge the service provided by the Flow Cytometric Analysis and Sorting Core Facility at NTUH.
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流式細胞分選儀FACSAriaIII、IV 收費標準:

雷射啟動支數 收費金額
兩支雷射(其中一支必含488nm) 新台幣750元/2小時
三支雷射(其中一支必含488nm) 新台幣1,000元/2小時
四支雷射 新台幣1,250元/2小時

1.流式細胞分選儀的收費方式依據雷射啟動的支數來進行計價,並以2小時為一個單位計算。

2.使用時間未達預約時間長度時,以預約時間長度為基準進行收費。

3.超過預約時間仍未前來使用者,按照原預約時間長度收費。

4.若需要,在不影響下一位使用者的使用權益下,經管理人員同意得延長使用時間,但需補繳超時使用費用。未滿一個單位者以一個單位計算。

5.若需要,在不影響其他使用者的使用權益下,得提前進行實驗,但以預約時間長度為基準進行收費,超過預約時間長度者需加收超時使用的費用。未滿一個單位者以一個單位計算。

6.非因儀器故障導致實驗結果不良,使用者仍須依收費標準付費。
** 請小心評估完成實驗所需要的時間以決定預約時間的長度!!

流式細胞分析儀LSRII 收費標準:

儀器設備 自行操作 操作員操作 校外人士使用
LSRII 新台幣100元/小時 新台幣250元/小時 新台幣650元/小時

1. 流式細胞分析儀收費以小時為單位,未滿一小時者以一小時計算。

2. 使用時間未達預約時間長度時,以預約時間長度為基準進行收費。

3. 超過預約時間仍未前來使用者,按照原預約時間長度收費。

4. 若需要,在不影響下一位使用者的使用權益下,經管理人員同意得延長使用時間,但需補繳超時使用費用。未滿一小時者以一小時計算。

5. 若需要,在不影響其他使用者的使用權益下,得提前進行實驗,但以預約時間長度為基準進行收費,超過預約時間長度者需加收超時使用的費用。未滿一小時者以一小時計算。

6. 非因儀器故障導致實驗結果不良,使用者仍須依收費標準付費。

委託服務收費流程:

  • 上機時請列印sorter服務申請單,並請計畫主持人簽名後交給技術員。(若委託操作分析儀則不需繳交)
  • 技術員會以計畫主持人為對象,統計使用狀況並向醫院核銷或申請收據核銷。或可選擇以現金支付(請持使用申請單及現金至醫院出納組直接繳費)。
  • 經查核無繳費之實驗室皆一律禁止使用共研之任何儀器。
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本核心設施以服務為宗旨,使用者於成果發表時,並不要求將服務提供者列為共同作者,但請務必在文章中致謝本核心,以幫助我們能夠持續地為大家提供更優質的服務,
建議致謝詞 ( Acknowledgements) 如下:

We would like to acknowledge the service provided by the Flow Cytometric Analyzing and Sorting Core Facility at National Taiwan University Hospital

若是在 Materials and Methods 中提到,則
建議如下:

Cells were sorted on FACSAriaIII (BD Bioscience, San Jose, CA) through the service provided by the Flow Cytometric Analyzing and Sorting Core Facility at National Taiwan University Hospital

若您的論文已發表,請您將PDF 檔e-mail 給本核心實驗室 (ntuhsorter@ ntuh.gov.tw)以便於收集統計。無限感激。

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國立臺灣大學醫學院附設醫院 National Taiwan University Hospital
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Page Last Updated:Aug 27th, 2019
Page Editor:Wen Yen Chang #63879