流式細胞儀 (Backman CytoFLEX)
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流式細胞儀 (Backman CytoFLEX)
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儀器特色
CytoFLEX Technology獨特技術
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對平台的卓越靈敏度有所幫助的獨特技術集合。
多波分光模組
是源自電信行業的技術，可對光的多重波長進行解構和測量。多波分光模組透射光導纖維和
帶通濾光片來分離光的波長。減少光損失，因此也增加了收光的效率。 |
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| WDM利用
雪崩光電二極管檢測器（APD）而非光電倍增管（PMT）。光電二極管的一個特點就是具有超過80％的高量子效率，特別是在波長超過800nm的時尤為如此。 |  |
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傳統的分析儀是通過同軸電纜和濾光片映射到流通室進行光束整形和聚焦來使雷射最佳化。這些光的相互作用作用會造成光損失。
光學集成系統-
。將光聚焦於流動室上所有這些技術都在CytoFLEX中得到運用從而確保光線得到有效管理進而使螢光標記細胞能夠達到最佳激發與發射，而這是充分發揮其性能的關鍵所在。 |
- 該機型配備三雷射: 藍光雷射(488nm)、紅光雷射(633nm)和紫光雷射(405nm)，提供了多色分析所需的靈活性和靈敏度。
- 具螢光大數據紀錄功能，可實現最多13色自動螢光補償。
- 高動態範圍可顯示相同樣本中的暗和明亮細胞群。
- 使用紫色側向散射光可檢測奈米顆粒(80nm)。
- 雷射，光學控制系統和流動室都被安裝到防震台上，維持光學校準。
- 低壓力流路系統，對細胞影響較小。
- 除了能收集FSC與SSC細胞顆粒性與大小訊號，還包括13個帶通濾光片：450 / 45，525 / 40（2），585 / 42，610 / 20（2），660/10（2），690 / 50，712 / 25和780/60（3）。
| Excitation Laser |
Fluorescence Channel |
常用螢光 |
| 488 nm |
525/45 | FITC | Alexa Fluor 488 | CFSE | GFP |
| 585/42 | PE | PI | | |
| 610/20 | ECD | PE-Texas Red® | PE-CF594 | PI |
| 690/50 | PC5 | PerCP | PC5.5 | PerCP-Cy5.5 |
| 780/60 | PC7 | DRAQ7TM | | |
| 638 nm |
660/10 | APC | Alexa Fluor 647 | eFluorTM 660 | Cy5 |
| 712/25 | APC-A700 | Alexa FluorTM 700 | Cy5.5 | DRAQ7TM |
| 780/60 | APC-A750 | APC-Cy7 | APC-eFluorTM 780 | APC-H7 |
| 405 nm |
450/45 | VSSC | | | |
| 525/40 | Krome Orange | AmCyan, V500 | BV510 | |
| 640/20 | BV605 | Qdot® 605 | | |
| 660/10 | BV650 | Qdot® 655 | | |
| 780/60 | BV785 | Qdot® 800 | | |
軟體
CytExpert Software for the CytoFLEX Platform
儀器外觀
開放時間
開放時間從早上8:00 ~ 晚上20:00。
適用耗材(由使用者自備)
(1) Round Bottle Tube (使用者自備)
表格內資料為建議使用之耗材。
若使用1.5-2.0 mL 離心管，請注意管蓋是否置於Sample Tube Holder的凹槽內，否則管蓋會於上樣時撞凹上樣針導致毀損，無法進樣。
| 名稱
|
Cat. No
|
備註/說明
|
Falcon®12x75 mm, 5 ml polystyrene tube,
non-sterile, without cap |
352008
|
非無菌用
|
| 其他需求 |
Falcon® 12x75 mm, 5 ml polystyrene tube,
sterile, with dual-position snap cap |
352058
|
具備蓋子 |
Falcon® 12x75 mm, 5 ml polystyrene tube,
sterile, with cell strainer cap |
352235
 |
藍色蓋子具有 35µm nylon mesh，可過濾樣本。
適合組織來源的細胞，進行單顆化，避免阻塞上樣針 |
Falcon® Cell strainers
(40µm / 70µm) |
352340/352350
 |
下緣可接50ml離心管，適合組織來源的細胞，去除組織和團塊，避免阻塞上樣針。 |
(2) Sheath Fluid 請使用ddH2O，不可使用PBS
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如何取得流式細胞儀 (Beckman CytoFLEX) 使用資格 ?
1. 請參與 第五共研 儀器課程
2.申請預約權限
請於
網路預約系統
，申請帳號，完成驗證後。重新登入，選取第五共研流式細胞儀 Beckman CytoFLEX 預約權限申請。
待管理人核可後，即可開始線上預約。
預約辦法：
- 當週開放兩週內預約，預約時段以半個小時為一個單位。開放時間從早上8:00 ~ 晚上20:00。
- 若無法依約定的時間上機，請於預約時段兩個小時前線上取消預約，否則警告1次。
✽若未取消紀錄累積2次，則取消下個月之預約權限。
- 系統每次開放30天內之預約時段。
每週(上班/熱門時段)最多預約四個時段，非上班時段則無限制。
若下一週時段未滿，則當週星期五之中午開放預約給需要更多實驗時段的實驗室進行預約，此時即不限制每個實驗室的預約次數，唯以當週尚未預約之實驗室為優先。
- 請以個人帳號自行預約，禁止以他人帳號預約，亦不得幫他人預約。
- 使用者因延後上機而超過其所預約的時段，請務必確認是否有其他使用者接續預約使用，並連絡告知，可請管理人協助通知。
若沒有處理，影響到後續使用者之使用，後續使用者或管理人有權中止程式，以維護後續使用者權利，將通知PI並警告一次。
操作規定：
- 操作電腦與儀器請勿戴手套。
- 請依開關機與清洗標準程序進行操作。
- 資料可暫存於資料夾:Data / 5th User，務必備份數據資料 (用燒錄方式 或 USB存取 )。
管理單位將不定期清理資料夾:Data，恕不通知。
- 請使用共研內配置的稀釋漂白水等來清洗儀器。
- 使用後請填寫儀器使用登記本，若有任何異常，請記錄「使用情況」一欄，並通知管理人處理，切勿自行調整儀器參數或硬體零件。
- 儀器使用完畢，請將帶來的實驗物品帶走，違者照相存證，將通知PI並警告一次。
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- 收費以半小時為單位進行計價，未滿半小時者以半小時計算，每半小時收費新台幣75元。
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本核心設施以服務為宗旨，使用者於成果發表時，並不要求將服務提供者列為共同作者，但請務必在文章中致謝本核心實驗室，以幫助我們能夠持續地為大家提供更優質的服務，
建議致謝詞 (
Acknowledgements) 如下：
We would like to acknowledge the service provided by the RCF5 Lab. of Department of Medical Research at National Taiwan University Hospital.
若您的論文已發表，請您將PDF 檔e-mail 給本實驗室管理員 (rcf5@ntuh.gov.tw)以便於收集統計。無限感激。
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