流式細胞儀 (BD FACSCalibur)
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儀器特色
- 該機型為第一台通過整合無需調校的光路設計、雷射間補償和雙雷射技術提供標準多色分析能力的流式細胞儀。
- 該機型配備雙雷射: 氬離子雷射(488nm)和紅色二極體雷射(633nm)，提供了多色分析所需的靈活性和靈敏度。
- 除了能收集FSC與SSC細胞顆粒性與大小訊號，可收集四個波段螢光訊號，如下表。
| Excitation Laser |
Fluorescence Channel |
常用螢光 |
| 488 nm |
FL1 Green
530/30
|
FITC |
Alexa
Fluor 488 |
|
|
FL2 Yellow
585/42 |
PE |
|
|
|
FL3 Red
670LP
|
PE-Cy5
|
PerCP |
PerCP-Cy 5.5 |
PE-Cy7 |
| 633 nm |
FL4 Red
661/16 |
APC |
Alexa
Fluor 647 |
|
|
* APC and PE-Cy5 同時使用可能需考慮 cross-beam compensation.
軟體
BD CellQuestTM Pro
儀器外觀
開放時間
開放時間從早上8:00 ~ 晚上20:00。
適用耗材
(1) Round Bottle Tube (使用者自備)
表格內資料為建議使用之耗材。
若使用其他廠牌，請注意管子是否可與上樣針之Bal Seal-O Ring 密合，否則會導致氣壓洩漏，無法進樣。
| 名稱
|
Cat. No
|
備註/說明
|
Falcon®12x75 mm, 5 ml polystyrene tube,
non-sterile, without cap |
352008
|
非無菌用
|
| 其他需求 |
Falcon® 12x75 mm, 5 ml polystyrene tube,
sterile, with dual-position snap cap |
352058
|
具備蓋子 |
Falcon® 12x75 mm, 5 ml polystyrene tube,
sterile, with cell strainer cap |
352235
 |
藍色蓋子具有 35µm nylon mesh，可過濾樣本。
適合組織來源的細胞，進行單顆化，避免阻塞上樣針 |
Falcon® Cell strainers
(40µm / 70µm) |
352340/352350
 |
下緣可接50ml離心管，適合組織來源的細胞，去除組織和團塊，避免阻塞上樣針。 |
(2)務必使用原廠出產之Sheath Fluid (共研提供)
BD FACSFlowTM Sheath Fluid (Cat. No. 342003)
參考資料
流式細胞儀 (BD FACSCalibur)
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如何取得 流式細胞儀 (BD FACSCalibur) 使用資格 ?
1. 請參與 第七共研 儀器課程
ps.因操作步驟複雜無錄影課程，請務必參與實體課程
2.實際操作與考核
完成儀器課程後，請與管理人預約第一次上機時間，由管理人陪同確認操作步驟，以取得使用資格。
若無法通過管理人考核，請重新上課。
3.申請預約權限
請於
網路預約系統
，申請帳號，完成驗證後。重新登入，選取第七共研 Flow cytometry 預約權限申請。
待管理人核可後，即可開始線上預約。
預約辦法：
1.當週開放兩週內預約，預約時段以1個小時為一個單位。
開放時間從早上8:00 ~ 晚上20:00。
2.因共同研究室有門禁管制，非共研人員下班時間進入共研，請依相關借用規定向管理人申請臨時門禁卡。
3.若無法依約定的時間上機，請於預約時段兩個小時前線上取消預約，否則警告1次。
※ 若未取消紀錄累積2次，則取消下個月之預約權限。
4.系統每次開放兩週內之預約時段。
每週(上班/熱門時段)最多預約四個時段，非上班時段則無限制。
若下一週時段未滿，則當週星期五之中午開放預約給需要更多實驗時段的實驗室進行預約，此時即不限制每個實驗室的預約次數，唯以當週尚未預約之實驗室為優先。
5.請以個人帳號自行預約，禁止以他人帳號預約，亦不得幫他人預約。
6.使用者因延後上機而超過其所預約的時段，請務必確認是否有其他使用者接續預約使用，並連絡告知，可請管理人協助通知。
若沒有處理，影響到後續使用者之使用，後續使用者或管理人有權中止程式，以維護後續使用者權利，將通知PI並警告一次。
操作規定：
1.操作電腦與儀器請勿戴手套。
2.請依開關機與清洗標準程序進行操作。
3.資料可暫存於資料夾:Data / 7th User，務必備份數據資料 (用燒錄方式 或 USB存取 )。
管理單位將不定期清理資料夾:Data，恕不通知。
4.請使用共研內配置的Triton X-100、稀釋漂白水等來清洗儀器。
5.共研有提供原廠Sheath Fluid，費用每季會依照使用時間比例結算。
6.使用後請填寫儀器使用登記本，若有任何異常，請記錄「使用情況」一欄，並通知管理人處理，切勿自行調整儀器參數或硬體零件。
7.儀器使用完畢，請將帶來的實驗物品帶走，違者照相存證，將通知PI並警告一次。
流式細胞儀 (BD FACSCalibur)
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本核心設施以服務為宗旨，使用者於成果發表時，並不要求將服務提供者列為共同作者，但請務必在文章中致謝本核心實驗室，以幫助我們能夠持續地為大家提供更優質的服務，
建議致謝詞 (
Acknowledgements) 如下：
We would like to acknowledge the service provided by the RCF7 Lab. of Department of Medical Research at National Taiwan University Hospital
若是在
Materials and Methods 中提到，則
建議如下：
Flow cytometric analysis was performed by using the BD FASCalibur instrument and BD CellQuestTM Pro (BD Bioscience, San Jose, CA).
若您的論文已發表，請您將PDF 檔e-mail 給本實驗室管理員 (ntuh4th@ntuh.gov.tw)以便於收集統計。無限感激。