高通量光譜流式細胞分析儀(Cytek N7-00007)

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高通量光譜流式細胞分析儀(Cytek N7-00007)

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儀器介紹

具備兩支雷射，包含以下波長

• 488±10nm; 50±5mW 藍光固態雷射。640nm±10nm; 80±8mW 紅光固態雷射，
  包含前方散射檢測器FSC與側方散射偵測器SSC，共24個檢測器，可執行10色以上的參數分析。
• 透過全光譜偵測技術讀取各種螢光的全光譜署名(Full Spectrum Signature)，
  藉此建立進行光譜拆解(Unmixing)的重要參考指標(Reference Control)。
• 同時收集樣本的自體螢光(Auto-Fluorescence, AF)的背景值光譜，讓使用者可進行自體螢光去除(AF extraction)
  來降低背景值的干擾，提升實驗結果的解析度(Resolution)。
• 有別於傳統濾片式的單一波段收光，透過比較螢光的全光譜署名實現於同一panel中使用散射光波長高度相似(Highly overlapping)的螢光染劑，
  例如: APC與 Alexa 647 ; BB515與FITC…等等，增加螢光染劑的使用彈性。
• 配置自動上樣系統，可使用任意廠牌之96 孔之U底、V底或平底標準微孔盤以及40管管架實現管式上樣自動化。
• 主要應用在測定淋巴球表面抗原、免疫分型、白血病分類，特別適用於多參數需求（9≥色以上)與高自體螢光之樣本分析。

高感度單色/彩色數位影像系統 (Digital Sight 10/Nikon)

• 感光元件：全片幅 CMOS 感光技術。
• 最高解析度：23.9百萬畫素 (6000 X 3984)。
• 大視野觀察：FOV 25mm。
• 彩色或單色拍攝模式。
• 即時影像速度：9 fps (6000 X 3984)、最高66 fps (1920 X 1080)。
• 曝光時間：100 micro second~120 second。
• 支援Time-lapse。
• 內建尺規及量測工具。
• 螢光影像疊圖套色、多重圖像拼接等圖像處理工具。

上樣方式

手動上樣與盤式上樣皆可

• 手動上樣：可使用任意廠牌之Polystyrene或Polypropylene材質12x75mm的5ml試管、無須綁定特定廠牌試管。
• 盤式上樣：可使用任意廠牌之96孔盤，包含(平底、U底、V底或深孔盤)，搭配tube rack至多可一次偵測40管樣本

靈敏度

採用APD半導體偵測器陣列進行光學訊號的收集，具有高光電轉換效率，低雜訊、高線性度的特性，
透過每日QC進行APD gain值微調達到每日螢光訊號一致化的

應用範圍

可執行細胞的絕對計數與液流流速即時偵測。
搭配不同試劑標記套組，對細胞進行定性及定量檢測。
可去除自體螢光，解決高背景值對於實驗數據的干擾。
可測量細胞寬度及面積。

耗材選用

建議採用原廠提供之耗材。(若有其他需求請洽管理者確認)。
請用Falcon tube上機 (若有其他需求請洽管理者確認)。
樣本上機前請將所有樣本完成“過篩”步驟避免塞管。
螢光種類之選擇建議，請參閱Cytek® Aurora Fluorochrome Selection Guidelines 2 Laser 14B 8R手冊P13(下表)

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上機檢體製備(品保區)

預約

• 本實驗室檢體限制:需當天染色完畢，在24小時內上機完畢。
• 請預先處理您的樣品，若樣品上機而造成機器堵塞及損壞，使用者需負賠償之責任。
• 為維持實驗室潔淨程度檢體以無菌為主且非動物來源，若提供上述檢體，請提出證明確保不會造成潔淨空間汙染。
• 對檢體有疑問，請致電細胞治療研究中心詢問。

品保區機儀規範

• 品管區所有機儀需上1小時以上(含)儀器教育訓練課程，完成課程後始可開放預約。(委託操作除外)。
• 開放一個月內的預約時段，流式細胞儀最慢需於實驗前一工作天下午五點前預約。
• 一般開放時間為星期一到星期五早上08:00~17:00(流式細胞儀早上08:00~09:00為機台校驗時段)，
  若需於非上班時段預約需先經管理員同意後，始可預約。
• 於客滿情況，每周最多能預約4小時，每週五中午開放下周未滿時段預約，此時即不限制預約時數。
• 預約以本實驗室在執行臨床試驗品管為優先，其次為臨床緊急且必須當日上機之檢體，請務必先與管理員確認可否上機。。
• 預約取消：
  取消預約請前2日下班前勾選取消，前1日下班前取消請來電或以E-mail與管理人員連絡。
  最遲請於預約時段前一天下班前(17:00)取消預約，否則即收取50元隔離衣裝備準備費用。一個月內取消預約次數不能超過2次，第3次則關閉預約資格1個月。

若需儀器檢驗結果檔案請於當日至管理員登錄E-mail及所需檔案，
於次日中午前會寄至該E-mail，或自備已經Format的空白隨身碟存檔。

高通量光譜流式細胞分析儀(Cytek N7-00007)

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因預約後，當日會執行儀器(日)校正，會酌收儀器校正耗材費400元/四小時，
不滿四小時以四小時計。其餘染劑及上樣管耗材請自備。

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本核心設施以服務為宗旨，使用者於成果發表時，請務必在文章中致謝本核心，以幫助我們能夠持續地為大家提供更優質的服務，
建議致謝詞 ( Acknowledgements) 如下：

We would like to acknowledge the service provided by the RCF9 Lab. at National Taiwan University Hospital.

若是在Materials and Methods中提到，則
範例如下：

Cells were analysis on Cytek Northern Lights system through the service provided by the Research Center for Cell Therapy (RCF9 Lab.) at National Taiwan University Hospital.

若您的論文已發表，請您將PDF檔e-mail至本核心實驗室(sonny1475@ntuh.gov.tw)以便於收集統計。無限感激。